層析冷柜的使用原理,讓你一次性看懂
層析冷柜的工作環(huán)境溫度一般應(yīng)保持在10℃-32℃,冰箱周圍的環(huán)境溫度應(yīng)保持在18℃-25℃??紤]到季節(jié)變化造成的能耗差異,要注意不要將冰箱放在熱源旁或通風(fēng)口處,以預(yù)留冰箱線路。讓冰箱自由呼吸:冰箱周圍至少有30厘米的空間,頂部至少有30厘米的空間。各種物品不得堆放在周圍,以免影響散熱。溫度過(guò)高或通風(fēng)不良易造成設(shè)備超負(fù)荷運(yùn)行和損壞。
設(shè)備應(yīng)使用獨(dú)立電源,并適當(dāng)接地。制冷系統(tǒng)兩次啟動(dòng)的間隔時(shí)間應(yīng)大于3分鐘,否則可能損壞制冷系統(tǒng)。儀器應(yīng)放在水平地面上操作。如果使用后長(zhǎng)時(shí)間不使用,應(yīng)將內(nèi)罐擦拭干凈,除去實(shí)驗(yàn)過(guò)程中留下的水和污漬,并取下電源。
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生物分子之間有許多特殊的相互作用,它們能特異地、可逆地結(jié)合在一起,稱為親和作用。親和層析是將兩個(gè)具有親和力的分子中的一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性分離純化另一個(gè)分子。固定在基質(zhì)上的分子稱為配體。配體與基體共價(jià)結(jié)合形成親和色譜固定相,稱為親和吸附劑。
在親和層析中,選擇與待分離生物大分子有親和力的材料作為配體,將配體共價(jià)鍵合到合適的不溶性基質(zhì)上。當(dāng)樣品溶液通過(guò)親和層析柱時(shí),待分離的生物分子與配體特異性結(jié)合,留在固定相上;而其他雜質(zhì)不能與配體結(jié)合,仍在流動(dòng)相中,隨洗脫液流出,因此只有待分離的生物分子在列中。用合適的洗脫液從配體中洗脫得到待分離的純化物質(zhì)。
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